effect of cold, heat and chemical stresses on the induction of androgenesis in lisianthus (eustoma grandiflorum)

[ ' s e v e r a l m e t h o d s a r e a v a i l a b l e t o p r o d u c e h a p l o i d p l a n t s . o n e o f t h e m o s t e f f i c i e n t m e t h o d s i s e s p e c i a l l y m i c r o s p o r e c u l t u r e . s t r e s s a s a t r i g g e r i n g f a c t o r i s e s s e n t i a l f o r e m b r y o g e n e s i s i n d u c t i o n i n m i c r o s p o r e s . i n t h e f i r s t e x p e r i m e n t ' , ' t h e e f f e c t o f d i f f e r e n t t h e r m a l s t r e s s e s i n c l u d i n g c o l d t r e a t m e n t s a n d h e a t s t r e s s a n d t h e c o n t r o l w e r e e v a l u a t e d . i n t h e s e c o n d e x p e r i m e n t ' , ' t h e e f f e c t o f 2 ' , 4 , ' d a n d i n t h e t h i r d e x p e r i m e n t e f f e c t o f p e g ' , ' 4 0 0 0 w e r e s t u d i e d . i n a d d i t i o n ' , ' s o m e o t h e r s t r e s s e s i n c l u d i n g h i g h m e d i u m p h ' , ' e t h a n o l a n d h i g h s p e e d o f c e n t r i f u g a t i o n w e r e a l s o t e s t e d . r e s u l t s s h o w e d t h a t c o l d p r e t r e a t m e n t ( 4 ˚ c f o r 1 d a y ) a n d h e a t s t r e s s ( 3 5 ˚ c f o r 2 d a y s ) i n d u c e d c e l l d i v i s i o n s . a m o n g s t r e s s e s t e s t e d ' , ' h e a t s t r e s s ( 3 5 ˚ c f o r 1 d a y ) w a s t h e m o s t e f f i c i e n t o n e f o r i n d u c t i o n o f a n d r o g e n e s i s . t h e b e s t c o n c e n t r a t i o n o f 2 ' , 4 , ' d f o r a n d r o g e n e s i s i n d u c t i o n w a s 2 5 m g / l t h a t i n d u c e d t h e h i g h e s t r a t i o o f m u l t i c e l l u l a r s t r u c t u r e s . t h e m o s t e f f e c t i v e c e l l u l a r c h a n g e s w e r e o b s e r v e d w h e n p e g i n 1 0 p e r c e n t d e n s i t y w a s a p p l i e d . t h e p h ( 6 . 5 a n d 7 ) i n d u c e d t h e i n i t i a t i o n o f m i c r o s p o r e c e l l u l a r d i v i s i o n s a n d c r e a t i o n o f m u l t i ' , ' c e l l u l a r s t r u c t u r e s . t h e h i g h s p e e d c e n t r i f u g a t i o n c a u s e d o n l y s w e l l i n g o f m i c r o s p o r e s . ' ]